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产品名称:毛霉属通用LAMP试剂盒

产品特点:毛霉属通用LAMP试剂盒上海一研生物相关产品:4-二甲:128.224- two methylamino HexahydropyridineCAS号:50533-97-6 C7H16N2

402有机担体402 organic body:CAS号:

5--2-(2,4-二氯氧)吡:255.15- amino -2- (2,4- two) pyridineCAS号:85686-48-2 C11H8

产品型号:50次

更新日期:2021-02-20

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50次毛霉属通用LAMP试剂盒的详细资料:

使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(用带芯枪头,下同)。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。

参数规格:

产品名称

毛霉属通用LAMP试剂盒

英文名称

 General lamp kit for Mucor

规格

50次

储存条件:
仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

检测步骤:
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
1) 计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。

4-二甲:128.224- two methylamino HexahydropyridineCAS号:50533-97-6 C7H16N2

402有机担体402 organic body:CAS号:

5--2-(2,4-二氯氧)吡:255.15- amino -2- (2,4- two) pyridineCAS号:85686-48-2 C11H8Cl2N2O

3--5-(4-溴)异噁唑:239.073- - -5- (4- Bromophenyl) isoxazoleCAS号:6525-98-0 C9H7BrN2O

对氯甲Chlorine toluene:126.59 C7H7ClCAS号:106-43-4

8-萘-1,6-二磺8- two sulfonic acid:303.31 C10H9NO6S2CAS号:129-91-9

2--3-甲-5-溴吡:187.042- amino -3- -5-CAS号:3430-21-5 C6H7BrN2

5-氯-2-氟硝:175.545- chloride -2-CAS号:345-18-6 C6H3ClFNO2

乙龙脑酯Bornyl acetate:196.29C12H20O2CAS号:20347-65-3

毛霉属通用LAMP试剂盒甲型流感 H5N3 (A/duck/Hokkaido/167/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

CD38 基因全长ORF克隆

PTCH1 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签

LHX4 基因全长ORF克隆

GABRA4 基因全长ORF克隆

TGF-beta 1 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签

CMPK1 基因全长ORF克隆

XCL1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

IL12A / NKSF1 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

CD40L / CD154 / TNFSF5 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

GM-CSF 基因全长ORF克隆 (密码子优化)(表达载体), 带Myc标签

重组大鼠 IFN-alpha / IFNA1 / IFN 蛋白 (Fc 标签)

 

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