产品名称:马立克氏病病毒LAMP试剂盒
产品特点:马立克氏病病毒LAMP试剂盒上海一研生物相关产品:1-异酸-1,2,3,4-四氢萘分子式:173.21名称:1- four hydrogen naphthalene:58490-95-2分子量: C11H11NO锌铜试剂分子式:128.94英称:锌铜试剂:53801-63-1分子量: Zn/Cu1,3,5-氟氯溴分子式:英:1,3,5- fluorine ch
产品型号:50次
更新日期:2021-02-20
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50次马立克氏病病毒LAMP试剂盒的详细资料:
参数规格:
产品名称 | 马立克氏病病毒LAMP试剂盒 |
英文名称 | Lamp kit for Marek's disease virus |
规格 | 50次 |
储存条件:
仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(用带芯枪头,下同)。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。
检测步骤:
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
(1) 计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
4-(3-溴)啉分子式:242.11英文名称:4- (3-) Ma Lan:197846-82-5分子量: C10H12BrNO
左旋千金藤碱英文名称:L-stepholidine分子式:327.37434分子量:C19H21NO4:16562-13-3
2-甲-3-溴吡分子式:172.02英文名称:2- methyl -3-:38749-79-0分子量: C6H6BrN
4--3-氯吡分子式:128.56英文名称:4- amino -3-:19798-77-7分子量: C5H5ClN2
1-异酸-1,2,3,4-四氢萘分子式:173.21英文名称:1- four hydrogen naphthalene:58490-95-2分子量: C11H11NO
锌铜试剂分子式:128.94英文名称:锌铜试剂:53801-63-1分子量: Zn/Cu
1,3,5-氟氯溴分子式:英文名称:1,3,5- fluorine chlorine bromobenzene:454157分子量:
4-二甲-4'-硝联分子式:242.28英文名称:4- two a -4'- nitro group:2143-87-5分子量: C14H14N2O2
黄连提取物英文名称:Extract of Rhizoma分子式:分子量::
马立克氏病病毒LAMP试剂盒小鼠 MEK1 / MAP2K1 / MKK1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
重组人 RET Kinase 蛋白 (aa 658-1114, His & GST 标签)
小鼠 BDNF 基因全长ORF克隆
人 DDIT4L 基因全长ORF克隆
人 FUT8 基因全长ORF克隆
人 FAIM3 基因全长ORF克隆
人 IL12B / NKSF2 / p40 ELISA配对抗体
大鼠 RHBDD1 基因全长ORF克隆
食蟹猴 CLP1 / COLEC12 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
小鼠 ANGPT1 基因全长ORF克隆
小鼠 TNFRSF1A / TNFRI / CD120a 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
人 STAT6 基因全长ORF克隆
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