产品名称:(RT-3)牛副流感病毒3型RT-LAMP试剂盒
产品特点:(RT-3)牛副流感病毒3型RT-LAMP试剂盒上海一研生物相关产品:没食子儿茶素没食子酸酯; (-)-Gal 4233-96-9 20mg 订购|咨询棉籽糖;Raffinose 512-69-6 20mg 订购|咨询马来酸;Maleic acid 110-16-7 20mg 订购|咨询麦冬皂苷B;Ophiopogonin B 38971-41-4 20mg 订购|咨询毛萼结甲;
产品型号:50次
更新日期:2021-03-05
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50次(RT-3)牛副流感病毒3型RT-LAMP试剂盒的详细资料:
参数规格:
产品名称 | (RT-3)牛副流感病毒3型RT-LAMP试剂盒 |
英文名称 | (rt-3) RT-LAMP kit for bovine parainfluenza virus type 3 |
规格 | 50次 |
储存条件:
仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(用带芯枪头,下同)。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。
检测步骤:
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
(1) 计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
3-O-没食子酰粘酸;3-O-gallo 20mg 订购|咨询
木犀草素-5-O-葡萄糖苷;Luteol 20344-46-1 20mg 订购|咨询
麦冬皂苷C;Ophiopogonin C 911819-08-4 10mg 订购|咨询
麦冬皂苷A;Ophiopogonin A 11054-24-3 10mg 订购|咨询
毛冬青酸;I1exo1ic acid 20137-37-5 20mg 订购|咨询
马兜铃内酰胺;Aristolactam 13395-02-3 20mg 订购|咨询
没食子儿茶素没食子酸酯; (-)-Gal 4233-96-9 20mg 订购|咨询
棉籽糖;Raffinose 512-69-6 20mg 订购|咨询
马来酸;Maleic acid 110-16-7 20mg 订购|咨询
麦冬皂苷B;Ophiopogonin B 38971-41-4 20mg 订购|咨询
毛萼结甲; Maoecrystal A 20mg 订购|咨询
(RT-3)牛副流感病毒3型RT-LAMP试剂盒睾特异性锚样蛋白1抗体 英文名称:ANKMY1 0.2ml
锚蛋白重复结构域蛋白13B抗体 英文名称:ANKRD13B 0.2ml
锚蛋白重复结构域蛋白20A1抗体 英文名称:ANKRD20A1 0.2ml
锚蛋白重复结构域蛋白20A3抗体 英文名称:ANKRD20A3 0.2ml
锚蛋白重复结构域蛋白22抗体 英文名称:ANKRD22 0.2ml
氢离子转运ATP合成酶6G抗体 英文名称:ATP6V1G2 0.1ml
锚蛋白重复结构域蛋白50抗体 英文名称:ANKRD50 0.2ml
锚蛋白重复结构域蛋白26抗体 英文名称:ANKRD26 0.2ml
锚蛋白重复结构域蛋白26抗体 英文名称:ANKRD26 0.2ml
丙型肝炎病毒核结合蛋白-1抗体 英文名称:ACY3 0.2ml
芳香基硫酸酯酶K抗体 英文名称:ARSK 0.2ml
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