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产品名称:莱氏无胆甾原体LAMP试剂盒

产品特点:莱氏无胆甾原体LAMP试剂盒上海一研生物相关产品:人 CYP2D6 基因全长ORF克隆

产品型号:50次

更新日期:2021-01-27

访问次数:25

50次莱氏无胆甾原体LAMP试剂盒的详细资料:

储存条件:
仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

参数规格:

产品名称

莱氏无胆甾原体LAMP试剂盒

英文名称

 Lamp kit for achst

规格

50次


使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(用带芯枪头,下同)。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。 
检测步骤:
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
1) 计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。

兔抗人纤维蛋白原(免疫血清) 0.5ml  支

Tea polyphenol 茶多酚 84650-60-2  20mg

AP标记抗体稀释液 10ml  瓶

透析袋 扁宽24 截留分子量20000 0.5m/即用型  管

anti-β-Actin Mouse Monoclonal antibody 100ul  瓶

Fumonisin B1 伏马毒素B1 116355-83-0  1mg

IgG干粉 100mg  支

Raddeanin A 竹节香附素A 89412-79-3  20mg

Coomassie brilliant blue G-250 考马斯亮蓝G-250 10g  瓶

Cocarboxylase 辅羧酶(TPP) 1g  瓶

2ml离心管,10盒/箱 500支  盒

Tectoridin 鸢尾苷 611-40-5  20mg

莱氏无胆甾原体LAMP试剂盒 HSD17B11 基因全长ORF克隆

小鼠 FLT1 基因全长ORF克隆

重组小鼠 IL36G / IL1F9 蛋白 (His 标签)

小鼠 c-kit / CD117 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

小鼠 CADM4 基因全长ORF克隆

大鼠 HMG1L1 基因全长ORF克隆

大鼠 BPIFA2F 基因全长ORF克隆

ROGDI 基因全长ORF克隆

MLH1 基因全长ORF克隆

CYP2D6 基因全长ORF克隆

SCARB3 ELISA配对抗体

大鼠 MRAP 基因全长ORF克隆

 

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