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F344胎鼠皮层神经元*培养基​操作步骤
点击次数:103 更新时间:2024-05-21

F344胎鼠皮层神经元*培养基操作步骤:

1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量,使的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。

2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。

特性:

1、细胞活力原代取材活力≥90产品复苏率≥60培养两天就能清晰看到轴突与树突,培养时间可长达13-16天。

2、细胞纯度:80以上细胞神经元细胞标记物为阳性

质量控制:本产品经过了细菌、真菌、霉菌、病毒(HIV、HBV、HCV)、支原体检测。

运输保存:采用干冰保存运输


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