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如何判断大鼠白介素13单克隆抗体是否聚集
点击次数：12 更新时间：2026-04-09
通过SDS-PAGE和动态光散射（DLS）可有效判断大鼠白介素13单克隆抗体是否发生聚集，两种方法分别从分子量偏移和粒径分布角度提供证据。
一、SDS-PAGE 法检测聚集（还原与非还原条件对比）
SDS-PAGE 可通过观察条带位置和数量变化判断是否存在共价聚集，尤其适用于检测由二硫键介导的稳定聚集体。
操作要点：
样品处理：将抗体样品分为两组，一组加入β-巯基乙醇或DTT（还原条件），另一组不加（非还原条件）。
电泳条件：使用4–12% Bis-Tris凝胶，150 V恒压电泳至染料前沿到达底部。
上样量：建议每孔加载 2–5 µg 抗体，确保信号清晰可辨。
动态光散射（DLS）法检测聚集（溶液状态实时分析）
DLS 是一种无需标记、快速评估蛋白质粒径分布的技术，特别适合检测溶液中微量聚集物。
操作要点：
样品准备：取 10–20 µL 抗体溶液（浓度0.5–1 mg/mL），用PBS缓冲液稀释，避免气泡。
测量角度：推荐使用 90°或反向散射角 进行检测，以提高对小粒子的灵敏度 。
温度控制：设定为 25°C，平衡5分钟后开始测量。