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小鼠α2抗纤溶酶(α2-AP)elisa检测试剂盒操作步骤
点击次数:410 更新时间:2021-09-27

小鼠α2抗纤溶酶(α2-AP)elisa检测试剂盒操作步骤:


1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在di一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。

2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4. 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。

5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

7. 温育:操作同3。

8. 洗涤:操作同5。

9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.

10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟。

人乳腺癌细胞;MDA-MB-231

人乳腺癌细胞;MDA-MB-435S

人乳腺癌细胞;MDA-MB-453

人恶性多发性畸胎瘤细胞;NTERA-2

人卵巢畸胎瘤细胞;PA-1

人胰腺癌细胞;PANC-1

人成骨肉瘤细胞;Saos-2

人神经母细胞瘤细胞;SH-SY5Y

人卵巢腺癌细胞;SK-OV-3

人骨肉瘤细胞;U-2 OS [U2OS;U2-OS;U-2OS]

人横纹肌肉瘤细胞;A-204

人肺腺癌细胞;Calu-3

人肾癌Wilms细胞;G401

人肝癌细胞;Hep G2 [HepG2]

人急性早幼粒白血病细胞;HL-60

人骨肉瘤细胞;HOS

人慢性髓系白血病细胞;K562

人前列腺癌细胞;LNCaP

人乳腺癌细胞;MCF 7B

人急性淋巴母细胞性白血病细胞;MOLT-4

人小细胞肺癌细胞;NCI-H209

黑人Burkitt淋巴瘤细胞;RAJI

人B淋巴细胞瘤细胞;RAMOS

人B淋巴细胞瘤细胞;RAMOS(RA.1)

人脑瘤细胞;SF126

人脑瘤细胞;SF763

人脑瘤细胞;SF767

人皮肤黑色素瘤细胞;SK-MEL-1

人肾上腺皮质癌细胞;SW-13

人结直肠癌细胞;T84

人急性单核细胞白血病细胞;THP-1

人神经胶质细胞瘤细胞;U251

人组织细胞淋巴瘤细胞;U937 [U-937]

人胃腺癌细胞;BGC-823

人低分化肺腺癌细胞;GLC-82 [GLC82]

人喉癌上皮细胞;Hep-2

人纤维肉瘤细胞;HT-1080

人绒癌细胞;JEG-3

人耐VP16绒癌细胞株;JEG-3/VP16

白介素-2转染耐VP16绒癌细胞;JEG-3/VP16-IL-2

TNFa转染耐VP16绒癌细胞;JEG-3-VP16-TNFa

人急性T淋巴细胞白血病细胞;Jurkat, Clone E6-1

人神经母细胞瘤细胞;BE(2)-M17

人乳腺癌细胞;MDA-MB-157

人成骨肉瘤细胞;MG-63

人小细胞肺癌细胞;NCI-H446

人多发性骨髓瘤细胞;RPMI-8226 [RPMI8826]


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