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原代细胞的分离与培养
点击次数:111 发布时间:2020-07-24
   原代细胞是指来源活体组织,经过特定分离方法制备而成的初始细胞。
  原代细胞离体时间短且不经过永生化过程,其生物学特性未发生很大变化,仍保持原有的遗传特征,可更好地反映细胞在体内的生长状态,从而获得与体内生理功能更接近的数据,很适合用于药物测试、细胞分化和转化等实验研究。
  原代细胞是出了名的难养,对培养环境和实验操作的要求更苛刻。细胞在体外通常只能传代少数几次,某些细胞(如神经元细胞)甚至无法进行传代。对于研究人员来说,如何才能经济高效地培养好细胞,并围绕这有限几次传代的细胞设计实验,是更大的一个挑战。
  原代细胞是取材于切除的动物组织,通过酶处理,在适当的条件下培养直至达到足够的数量。分离的细胞有两种类型:贴壁细胞(锚定依赖性生长)和悬浮细胞(锚定非依赖性),贴壁细胞多来自器官组织,而悬浮细胞多来自血液系统的细胞。
  从组织制备细胞,即使捱过了极其严苛的解离步骤,不严谨的分离操作可能会导致细胞生长缓慢、表型不一致甚至细胞污染,特别是由于组织中可能含有细菌等微生物,污染问题对于细胞的分离和培养是一个很大的隐患。而为了让研究人员不再为这些问题头疼,现在已经出现了一些细胞公司可供应现成的细胞,并对应配有充分优化的培养基和实验方案,这使得细胞的培养和研究比以往要轻松得多。
  而对于具备自主从组织中获取细胞的实验室,也建议以商业化的细胞作为对照,采用均一性和稳定性更好的P2/P3代次进行实验,并用专门的细胞培养基进行培养,zui大限度提高原代细胞的生长。
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